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IgG全長抗體酵母展示

展示技術廣泛用于抗體的高通量篩選。目前常用的噬菌體展示和酵母展示技術主要用于展示單鏈可變區抗體片段(ScFv),通過展示技術篩選出的抗體片段,需要進行結構轉換,將抗體片段結構轉換成IgG全長抗體結構,應用于抗體藥物開發。但是通過結構轉換形成的IgG全長抗體可能會失去活性,需要對轉換后的IgG全長抗體進一步進行體外成熟優化,才能篩選出具有高親和力的抗體。最直接有效的策略是通過展示IgG全長抗體,進行體外親和力成熟優化篩選。動物細胞可以用于展示IgG全長抗體,進行體外親和力成熟優化篩選。但是與噬菌體展示和酵母展示技術相比,動物細胞展示技術通量小,操作難度大,周期長,成本高,無法高效達到體外親和力成熟的目標。

我們基于糖工程畢赤酵母技術,用糖工程畢赤酵母代替動物細胞,開發出IgG全長抗體酵母展示技術平臺,用它可以代替噬菌體和傳統的酵母展示技術,構建大容量人源IgG全長抗體庫,進行高通量親和力體外成熟篩選,選出的高親和力、高表達IgG全長抗體不需要結構形式改變,可以直接表達生產進行動物實驗和臨床實驗,是一種穩定高效的抗體親和力成熟系統。

我們是目前全球少數幾家能提供IgG全長抗體酵母展示技術的企業,可以對外提供涵蓋抗體人源化、抗體親和力成熟、抗體表達生產在內的抗體基因工程改造一站式服務。


IgG全長抗體酵母展示技術具有其他展示技術沒有的潛在優勢

1、糖工程畢赤酵母具有類似于動物細胞的真核表達系統質量控制機制,能夠確??贵w的正確空間結構折疊,具有人源N-糖基化等多種翻譯后加工功能,因而展示的IgG抗體在分子結構、理化特性 和生物學功能方面最接近于天然抗體,可以直接用于動物實驗和臨床試驗。但是噬菌體是原核表達系統,只能展示ScFv等抗體片段,通過結構轉換形成的IgG抗體可能會失去活性。

2、與動物細胞展示技術相比,IgG全長抗體酵母展示技術具有抗體庫容量大,操作簡單,周期短,成本低,能高通量篩選IgG全長抗體。

3、酵母展示系統采用FACS分選技術,基于IgG抗體親和力及展示水平進行篩選,可以消除表達水平不同引起的偏差,而且能區分親和力差異很小的克隆。但是噬菌體展示篩選抗體時,表達水平的不同會影響抗體親和力的篩選。

4、采用FACS分選技術能夠一次直接分選高、中、低親和力的克隆。

5、通過使用雙染色的FACS,可以直接用酵母展示抗體確定抗體親和力,不需要進行耗時的亞克隆、表達和純化。

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